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特发性视神经炎诊断分子标记物circRNA、试剂盒及应用特发性视神经炎诊断分子标记物circRNA、试剂盒及应用 发明授权 授权 基本信息 申请号: CN202010325792.5 申请日: 2020-04-23 公开(公告)号: CN111733227B 公开(公告)日: 2021-07-02 优先权号 - 优先权日 - IPC分类号: C12N15/113；C12Q1/686；C12Q1/6883 CPC分类号 - 专利类型: 发明授权 简单法律状态: 有效 摘要 本发明涉及生物检测领域，特别涉及特发性视神经炎诊断分子标记物circRNA、试剂盒及应用。本发明采用circRNA芯片检测以获取异常表达的脑脊液circRNAs表达谱，并应用qRT‑PCR的方法进行验证，具有严密的设计和成熟的评价体系。首次发现脑脊液中hsa_circ_0007503作为一个重要的生物学检测指标，检测指标微创廉价，可广泛应用于临床检测，解决特发性视神经炎临床诊断时间长，过程繁琐，成本较高，并且灵敏度低的问题。为特发性视神经炎的诊断提供新的思路，同时为完善特发性视神经炎的发病机制以及治疗靶点提供新的方向。 权利要求 1.环状非编码RNA在制备特发性视神经炎早期诊断的分子标记物中的应用；所述环状非编码RNA为hsa_circRNA_0007503，其序列如SEQ ID No.1所示；hsa_circRNA_0007503表达量上调。 2.检测环状非编码RNA表达水平的产品在制备特发性视神经炎早期诊断工具中的应用；所述环状非编码RNA为hsa_circRNA_0007503，其序列如SEQ ID No.1所示；hsa_circRNA_0007503表达量上调。 3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品包括：通过实时荧光定量PCR检测所述环状非编码RNA表达水平的试剂。 4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述产品为特异性扩增所述环状非编码RNA的引物，序列如SEQ ID No.23所示。 说明书 特发性视神经炎诊断分子标记物circRNA、试剂盒及应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物检测领域，特别涉及特发性视神经炎诊断分子标记物circRNA、试剂盒及应用。 背景技术 [0002]视神经炎指由多种病因导致的急性视神经的炎性病变，是青中年人最易罹患的致盲性视神经疾病。主要以急性或亚急性视力下降，眼球转动痛为表现，分类包括特发性、感染相关性、自身免疫相关性以及其他类型。其中特发性视神经炎是其中最常见的类型，其病因复杂，部分患者反复发作，预后相对较差，甚至使患者视力终生无法恢复，目前仍然是眼科领域的疑难疾病，也是导致中青年人群视力丧失的重要原因之一，对患者的生理和心理健康都造成了严重的影响。临床上为了准确诊断特发性视神经炎，需要与多种疾病进行鉴别排除，如非动脉炎性缺血性视神经病变、遗传性视神经病变等。诊断方法主要依靠检测血清学感染指标，血液学自身免疫指标以及脑脊液相关生化指标综合判断，检测过程耗时较长且过程繁琐。视神经脊髓炎(Neuromyelitis Optica，NMO)作为特发性视神经炎中的一类，临床常采用血清或脑脊液中的水通道蛋白4抗体(aquaporin‑4 IgG,AQP4‑IgG)作为临床诊断的特异性标志物。但20％‑30％具有临床症状的NMO患者无法检测到AQP4‑IgG，且该抗体不能区分疾病严重程度也不能鉴别疾病的不同表型。所以对于特发性视神经炎疾病，寻找新的可靠而准确的临床生物标记物对诊断具有非常重要的意义。 [0003]circRNA是一类由特殊剪切机制形成的、具有闭合环状结构的非编码RNA(non‑coding RNA,ncRNA)，通过转录调控在生理及病理过程中发挥作用。circRNA的组织特异性、疾病特异性、时序特异性及高稳定性等特点使其成为潜在的临床疾病的生物标记物。目前关于circRNA作为生物标志物在多种疾病中都得到了验证，尤其是癌症领域，例如肺癌、乳腺癌等都已找出高灵敏度的circRNA指标作为生物标志物来辅助临床诊断。近年来circRNA在疾病中的作用机制也成为研究热点，使circRNA生物标志物成为揭示治疗疾病靶点的关键分子。但目前针对特发性视神经炎相关circRNA的研究还较少，以circRNA作为生物标志物的研究未见报道。 发明内容 [0004]有鉴于此，本发明提供一种特发性视神经炎诊断分子标记物circRNA、试剂盒及应用。本发明建立特发性视神经炎患者circRNAs表达谱，提供一种用于特发性视神经炎早期诊断的circRNA，建立相较于目前手段更加快速、灵敏度高的方法以应用于临床诊断，并为疾病提供潜在治疗靶点。 [0005]为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案： [0006]本发明提供了环状非编码RNA在制备特发性视神经炎早期诊断的分子标记物中的应用；所述环状非编码RNA为hsa_circRNA_0007503、hsa_circRNA_007630、hsa_circRNA_406587、hsa_circRNA_054220或hsa_circRNA_005133中的一个或多个。 [0007]在本发明的一些具体实施方案中，hsa_circRNA_0007503和/或hsa_circRNA_007630表达量上调；hsa_circRNA_406587、hsa_circRNA_054220和/或hsa_circRNA_005133表达量下调。 [0008]在上述研究的基础上，本发明还提供了检测环状非编码RNA表达水平的产品在制备特发性视神经炎早期诊断工具中的应用；所述环状非编码RNA为hsa_circRNA_0007503、hsa_circRNA_007630、hsa_circRNA_406587、hsa_circRNA_054220或hsa_circRNA_005133中的一个或多个。 [0009]在本发明的一些具体实施方案中，hsa_circRNA_0007503和/或hsa_circRNA_007630表达量上调；hsa_circRNA_406587、hsa_circRNA_054220和/或hsa_circRNA_005133表达量下调。 [0010]在本发明的一些具体实施方案中，所述产品包括：通过实时荧光定量PCR检测所述环状非编码RNA表达水平的试剂。 [0011]在本发明的一些具体实施方案中，所述产品为特异性扩增所述环状非编码RNA的引物，序列如SEQ ID No.2～3所示。 [0012]本发明还提供了检测环状非编码RNA表达水平的产品，包括特异性扩增所述环状非编码RNA的引物；所述环状非编码RNA为hsa_circRNA_0007503、hsa_circRNA_007630、hsa_circRNA_406587、hsa_circRNA_054220或hsa_circRNA_005133中的一个或多个。 [0013]在本发明的一些具体实施方案中，所述引物的序列如SEQ ID No.2～3所示。 [0014]在本发明的一些具体实施方案中，所述检测的样本包括脑脊液、血浆、全血样本。脑脊液是临床常用的体液标本，产生于侧脑室的脉络丛，其自身在脑室和脊髓池中不断循环流动，并且保持相对稳定的化学及物理条件。脑脊液中的外泌体可以运输细胞之间交互的信号，包括lncRNAs、mRNAs、蛋白质、脂质及circRNAs。由于脑脊液直接与中枢神经细胞接触进行物质交换，所以相对于血浆、血液等样本更适合作为中枢神经系统疾病诊断的样本，具有在临床广泛应用的潜能。 [0015]本发明还提供了检测环状非编码RNA表达水平的试剂盒，包括所述的产品以及可接受的试剂。 [0016]本发明的优点包括但不限于： [0017]circRNA具有稳定性好，不易降解等优点，有较高的辅助诊断价值，利于临床推广使用。本发明采用circRNA芯片检测以获取异常表达的脑脊液circRNAs表达谱，并应用qRT‑PCR的方法进行验证，具有严密的设计和成熟的评价体系。首次发现脑脊液中hsa_circ_0007503作为一个重要的生物学检测指标，检测指标微创廉价，可广泛应用于临床检测，解决特发性视神经炎临床诊断时间长，过程繁琐，成本较高，并且灵敏度低的问题。为特发性视神经炎的诊断提供新的思路，同时为完善特发性视神经炎的发病机制以及治疗靶点提供新的方向。 |